がんの診断・治療につながる環状ペプチドを発見！
- がん細胞の転移や抗がん剤耐性を促進する肝細胞増殖因子（HGF）（※1）と特異的に結合する環状ペプチド（※2）「HiP-8」を発見し，HiP-8 がHGF の作用を阻害すること，およびHiP-8 により体内のHGF が豊富ながん組織を可視化できることを実証した。
- RaPID 法（※3）を用いて，HGF に結合する環状ペプチドを初めて取得することに成功した。この環状ペプチド「HiP-8」は，極めて高い特異性でHGF に結合するとともに，HGF の作用を阻害することを明らかにした。また，放射性同位元素で標識したHiP-8 をがんモデルマウスに投与することで，個体内のHGFが豊富ながん組織をPET（ポジトロン断層法）イメージング（※4）により可視化できることを実証した。
- 転移性の高いがんや抗がん剤が効き難いがんの治療や画像診断に活用されることが期待される。
概要
金沢大学がん進展制御研究所／ナノ生命科学研究所／新学術創成研究機構の酒井克也助教，柴田幹大准教授，松本邦夫教授，東京大学大学院理学系研究科の菅裕明教授，理化学研究所生命機能科学研究センターの向井英史ユニットリーダー，渡辺恭良チームリーダーらの共同研究グループは，がん細胞の転移や抗がん剤耐性を促進する肝細胞増殖因子（HGF）（※1）と特異的に結合する環状ペプチド（※2）「HiP-8」を発見し，HiP-8 がHGF の作用を阻害すること，およびHiP-8 により体内のHGF が豊富ながん組織を可視化できることを実証しました。
HGF は細胞外に分泌されるタンパク質であり，その受容体タンパク質MET と結合することで，組織の成長・再生を促します。ところが，さまざまながん組織においては，HGF ががん細胞に作用すると，がんの転移や抗がん剤に対する耐性獲得を促進します。そのため，HGF-MET の結合を阻害する分子の開発が求められています。
本共同研究グループは，RaPID 法（※3）を用いて，HGF に結合する環状ペプチドを初めて取得することに成功しました。この環状ペプチド「HiP-8」は，極めて高い特異性でHGF に結合するとともに，HGF の作用を阻害することを明らかにしました。また，放射性同位元素で標識したHiP-8 をがんモデルマウスに投与することで，個体内のHGFが豊富ながん組織をPET（ポジトロン断層法）イメージング（※4）により可視化できることを実証しました。
これらの研究成果は，転移性の高いがんや抗がん剤が効き難いがんの治療や画像診断に活用されることが期待されます。
本研究成果は，2019 年5 月17 日（米国東海岸標準時間）に国際科学雑誌『Nature Chemical Biology』に掲載されました。
研究の背景
HGF は細胞増殖因子と呼ばれるタンパク質の一種であり，細胞膜上の受容体タンパク質MET と結合することによってその生理作用を発揮し（図1），細胞の増殖や遊走，組織の修復・再生を促します。がん組織においては，がん細胞の浸潤や生存を促進する結果，がんの転移や抗がん剤の効き目を弱める薬剤耐性の獲得に関与します（図2）。HGF は活性のない前駆体HGF としてさまざまな組織に存在する一方，がん細胞近傍でのみ活性型HGF に変換されます（図2）。そのため，活性型HGF のみを選択的に阻害・検出する分子が，がんの治療用医薬や診断薬として期待されますが，これまでそのような分子は取得されていませんでした。
特定の分子を選択的に阻害する分子標的薬は，がんを含む多数の疾患に利用されています。中でも，抗体タンパク質は標的分子に高い特異性を持っていますが，コストが高いことが難点です。一方，化合物医薬は，化学合成で製造できるため安価ですが，標的分子に対する特異性は高くありません。そこで最近にわかに注目されているのが，抗体タンパク質に匹敵する標的特異性を持ち，化学合成で製造可能な環状ペプチドです。
研究成果の概要
本共同研究グループは，まず，グループ内の菅裕明教授によって確立されたRaPID 法を用いて，活性型HGF にのみ特異的に結合しHGF の作用を阻害する環状ペプチド「HiP-8」を世界で初めて取得することに成功しました。HiP-8 は12 個のアミノ酸がリング状に連結した環状ペプチドであり（図3），極微量でHGF に結合し，HGF がその受容体MET に結合することを阻害します（図3）。
また，本研究では，HiP-8 のHGF への作用機作を明らかにするため，生体分子のリアルな動きや形状変化を観察できる高速原子間力顕微鏡（HS-AFM）（※5）を用いて，HiP-8の作用を観察しました（図4）。その結果，HGF 分子の形状はダイナミックに変化しているのに対して，HiP-8 が結合すると，HGF 分子のダイナミックな形状変化（分子動態）が強く阻害されることを可視化することに成功しました。タンパク質の活発な分子動態が小さな分子によって阻害されることを観察した初めての成果です。
さらに，本共同研究グループは，HiP-8 のがん診断への応用を検討するため，ヒト肺がん組織を移植したマウスに放射性同位元素で標識したHiP-8 を投与し，PET（ポジトロン断層法）によるイメージング解析を行いました。解析の結果，HiP-8 は活性型HGF の豊富ながん組織に選択的に集積することを明らかにしました（図5）。本結果は，HiP-8は画像診断のためのPET プローブとして有用であることを示唆しています。また，HiP-8はHGF の作用を阻害することから，活性型HGF に選択的な抗がん剤としての応用が期待されます。
今後の展開
本研究により，環状ペプチドHiP-8 を用いた新しいPET 検査法の開発や，活性型HGFだけを選択的に阻害する分子標的薬の開発につながると期待されます。
本研究は，文部科学省世界トップレベル研究拠点プログラム（WPI），国立研究開発法人日本医療研究開発機構（AMED）次世代がん医療創生研究事業「イメージング活用創薬の視点からの異分野技術融合によるシームレスな薬効評価システムの構築と実施」（研究代表者 渡辺恭良，研究開発分担者 松本邦夫，向井英史），AMED 革新的バイオ医薬品創出基盤技術開発事業「特殊環状ペプチドを中核とした革新的次世代バイオ医薬品開発の加速」（研究代表者 菅裕明），日本学術振興会科学研究費助成事業，国立研究開発法人科学技術振興機構（JST），公益財団法人武田科学振興財団，公益財団法人三谷研究開発支援財団，大阪大学タンパク質研究所共同研究事業，金沢大学がん進展制御研究所共同研究費の支援を受けて実施されました。
図1.
HGFは697個のアミノ酸からなるタンパク質（左）。HGFは細胞膜の受容体（MET）に結合し，生理作用を発揮する（右）。
図2.
HGFは不活性前駆体として分泌され，がん組織で活性型に変換される。HGFはがん細胞の浸潤や転移を促したり（上），抗がん剤に対するがん細胞の抵抗性（耐性）を高める（下）。
図3．
HiP-8の作用機作。HiP-8はHGFに結合し，HGFが受容体に結合することを阻害する。
HGF
HGF+HiP-8
図4.
高速原子間力顕微鏡による観察。黄色の線はHGF分子の形状の動きを示す。HGFの形状は活発に変化する（左）一方，HiP-8が結合すると，HGFのダイナミックな形状変化（分子動態）は強く抑制された（右）。
図5．
HiP-8を用いたPET試験。HiP-8（プローブ）がHGFの豊富ながん（マウスに移植）に集積。腎臓や肝臓からプローブが速やかに排泄されることによって，がん組織がコントラスト高く可視化されている。
用語解説
掲載論文情報
- 論文タイトル
- Macrocyclic peptide-based inhibition and imaging of hepatocyte growth factor
（環状ペプチドによる肝細胞増殖因子（HGF）の阻害とイメージング） - 著者
- Katsuya Sakai, Toby Passioura, Hiroki Sato, Kenichiro Ito, Hiroki Furuhashi, Masataka Umitsu, Junichi Takagi, Yukinari Kato, Hidefumi Mukai, Shota Warashina, Maki Zouda, Yasuyoshi Watanabe, Seiji Yano, Mikihiro Shibata, Hiroaki Suga*, Kunio Matsumoto*
（酒井克也1,2，パショウラ・トビー 3，佐藤拓輝2，伊藤健一郎3，古橋弘貴2，海津正賢4，高木淳一4，加藤幸成5，向井英史6，藁科翔太6，造田真希6，渡辺恭良6，矢野聖二1,2，柴田幹大2,7，菅裕明3*，松本邦夫1,2,7*）（*責任著者）
- 金沢大学がん進展制御研究所
- 金沢大学ナノ生命科学研究所
- 東京大学大学院理学系研究科
- 大阪大学蛋白質研究所
- 東北大学大学院医学系研究科・未来科学技術共同研究センター
- 理化学研究所生命機能科学研究センター
- 金沢大学新学術創成研究機構
- 掲載誌
- Nature Chemical Biology
- 掲載日
- 2019.05.17
- DOI
- 10.1038/s41589-019-0285-7
- URL
- http://doi.org/10.1038/s41589-019-0285-7